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科研实验室无菌操作

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(一)无菌操作前的准备工作

培养材料接种时的无菌操作过程除上述各项操作外,还需完成以下无菌操作步骤,从而获得接种的无菌培养材料。


工作人员无菌操作前需用肥皂刷洗双手及手臂,并用流水冲净,并对手臂**后穿戴好**工作服、工作帽和口罩,更换拖鞋,才能进入无菌操作区。如进入层流操作室进行实验操作,应完成缓冲准备区内的淋浴、一次更换**衣帽、拖鞋;手臂**、二次更换**防护衣帽、手套、拖鞋等;再在风淋区进行无菌风淋后方可进入层流操作室。进入无菌操作区后,再用70%~75%的酒精擦拭双手和前臂,完成无菌操作准备工作。


用70%~75%酒精擦洗工作台面后,将已****的实验用品取出,并将操作器械放置在无菌器械支架上,然后开始实验操作。在实验操作过程中,对所有操作器械每次使用后都要进行**,常采用酒精灯火焰灼烧**。


(二)无菌操作步骤

准备工作完成后,对来自于自然生长条件下的外植体,按上述培养材料**方法**后取出,放入已**的培养皿中,然后置超净工作台酒精灯火焰下方,用**剪刀等器械进行适当分离、切割或其它处理后备用。

在酒精灯火焰处将培养容器的瓶塞(盖)轻轻打开,瓶口在灯焰处旋转灼烧,用镊子将培养材料置入培养液上,将镊子在酒精瓶中浸蘸酒精,置酒精灯上灼烧后放回支架,然后迅速灼燎瓶塞(盖)数秒后塞回瓶口。对继代培养材料的无菌操作,需在灯焰处打开瓶塞(盖),继代材料为液体培养细胞时直接用**吸管吸取培养细胞液放入新培养液中;继代材料为固体培养细胞时用**镊子挑取适量材料置新培养液上;继代材料为其他组织时,用**剪刀或其他器械进行培养材料适当切割后,用**镊子将其置于新培养液上(中),然后迅速灼燎瓶塞(盖)数秒后塞回瓶口。

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